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一种快速获得灯盏花三倍体的方法  
 【申请号】  CN201310660757.9  【申请日】  2013-12-09
 【公开号】  CN103651103A  【公开日】  2014-03-26
 【申请人】  云南省农业科学院药用植物研究所  【地址】  650200 云南省昆明市盘龙区北京路2238号
 【共同申请人】  
 【发明人】  董志渊;李绍平;杨丽英;王馨;李林玉;杨斌;马维思;严世武
 【国际申请】    【国际公布】  
 【进入国家日期】  
 【专利代理机构】  昆明正原专利商标代理有限责任公司 53100  【代理人】  陈左
 【分案原申请号】  
 【国省代码】  53
 【摘要】  本发明公开了一种快速获得灯盏花三倍体的方法,采用细胞微管抑制剂氨磺灵(Oryzalin)的水溶液浸泡处理当年采收的饱满灯盏花饱种子,诱导胚芽生长点细胞染色体加倍;苗期、现蕾期连续二次进行叶片气孔鉴定,快速筛选获得四倍体变异植株;四倍体变异植株与二倍体植株杂交(染色体加倍的卵细胞与正常精细胞融合)获得倍性纯合的三倍体。该方法通过利用被子植物有性生殖受精过程中单细胞(卵细胞)与单细胞(精细胞)融合,同步实现了植株染色体倍性纯化和三倍体获得,免除了纯化四倍体变异植株倍性的大量烦琐工作,为创制丰富的灯盏花三倍体新种质和培育三倍体新品种提供了技术支持。
 【主权项】  一种快速获得灯盏花三倍体的方法,其特征在于,步骤如下:a、采用浓度60?90μmol/L?的细胞微管抑制剂氨磺灵(Oryzalin)水溶液浸泡处理当年采收的饱满灯盏花种子,浸泡处理时间24?72h,每50mL氨磺灵(?Oryzalin)水溶液处理900?1000粒灯盏花饱满种子,处理结束后蒸馏水清洗3次;b、处理后的种子播种育苗,待长出4?6片真叶时,取第4?6片真叶的下表皮,进行气孔鉴定,选择气孔显著增加的植株作为四倍体变异初选植株进行盆栽;气孔鉴定中,以气孔周长代表气孔大小,同批次栽培二倍体植株作为对照,以极显著大于对照的植株鉴定为四倍体变异初选植株;c、进入现蕾期,取四倍体变异初选植株花序基部叶片下表皮再次进行气孔鉴定,进一步筛选获得气孔保持显著增大的植株作为四倍体变异植株,气孔鉴定具体方法同步骤b;d、以四倍体变异植株为母本,二倍体植株为父本,进行杂交;e、收获杂交成熟种子,进行播种育苗,待植株长出4?6片真叶时,取植株根尖进行染色体倍性鉴定,染色体鉴定为三倍体的植株再进行核DNA含量流式细胞光度分析,最终确认获得三倍体植株(2n=3x=27)。
 【页数】  6
 【主分类号】  A01H1/02
 【专利分类号】  A01H1/02;A01H1/04;A01H1/08
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